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幽门螺杆菌阿莫西林稳定耐药克隆的筛选及其基因突变的检测

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目的 探讨阿莫西林(AMX)不稳定耐药的幽门螺杆菌(Hp)演化成AMX稳定高水平耐药的表型及其突变基因的检测。方法 以冻存后的Hp菌株H390作为出发菌株，在不断增加AMX浓度的培养基上连续传代，筛选对AMX耐药的克隆，检测耐药克隆的最小抑菌浓度(MIC)，置于-80℃冻存3个月后再复苏，根据冻存后MIC下降情况判断其耐药性是否稳定。对获得的AMX最高MIC值的克隆H390r和出发菌株H390进行基因组测序分析和外排泵抑制试验，检测并鉴定与H390r获得的AMX高水平耐药性相关的基因突变。结果 通过AMX筛选获得4个AMX高水平耐药克隆，MIC分别为12、32、64和≥256 mg/L，经-80℃冻存后，MIC均未发生改变。相比于亲本菌株H390，AMX稳定耐药克隆H390r存在多个基因的突变，包括与AMX耐药性相关的编码RND外排系统的 hefC、编码孔蛋白的 hopB与 hopC和编码青霉素结合蛋白的ftsI。H390r在有外排泵抑制剂存在时对AMX 的MIC 大幅降低。 结论 AMX 能够在不稳定耐药的Hp中筛选出稳定耐药的克隆;H390r存在与AMX耐药相关的hefC、hopB、hopC和ftsI基因突变。这些突变可能是H390r获得AMX稳定高水平耐药的主要原因。
Screening of stable amoxicillin resistant clones of Helicobacter pylori and detection of its gene mutations

Helicobacter pyloriamoxicillinunstable resistancestable resistance

陆秋丹、糜孟衡、崔古贞、张峥嵘、吴晓娟、陈峥宏

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贵州医科大学基础医学院贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室,贵阳 550025

黔东南州人民医院检验科,凯里 556000

贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室(贵州省医学分子生物学重点实验室),贵阳 550004

幽门螺杆菌 阿莫西林 不稳定耐药 稳定耐药

国家自然科学基金贵州医科大学国基培育项目贵州省教育厅滚动支持省属高校科研平台团队项目

8186035320NSP005黔教技[2022]019号

2024

10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2024.01.007

安徽医科大学学报
安徽医科大学

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CSTPCD北大核心
影响因子：1.095
ISSN：1000-1492
年,卷(期)：2024.59(1)
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