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转基因大豆MON87701品系qPCR和3D-dPCR检测方法的建立

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转基因大豆MON87701是由孟山都公司研发的商业化抗虫大豆品系,目前已在17个国家广泛应用.为建立适用于MON87701大豆的高效检测方法,本研究基于实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitive PCR,qPCR)和芯片式数字PCR(3D digital PCR,3D-dPCR)平台,对44种不同转基因材料进行测试,建立双重定量检测方法.研究结果显示:只在转基因大豆MON87701样品中获得了阳性结果,证实该方法中引物和探针组合具有较高的特异性.进一步对2％、0.9％、0.09％和0.02％不同含量的MON87701转基因大豆进行定量测试,建立的qPCR和3D-dPCR两种方法的定量限均达到0.09％,检出限均达到0.02％,两者并无明显差别,但由于3D-dPCR和qPCR相比不需要标准物质制作标准曲线,并且对DNA提取质量要求更低,因此使用起来更加便捷高效,为转基因检测提供了新的方法和思路.
Establishment of qPCR and 3D-dPCR Detection Method of Genetically Modified Soybean MON87701

温洪涛、杨洋、丁一佳、张晓磊、关海涛、李亮、张瑞英

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黑龙江省农业科学院农产品质量安全研究所,黑龙江哈尔滨150086

中国农业科学院生物技术研究所,北京100081

转基因大豆 MON87701 定量检测 qPCR 3 D-dPCR

转基因新品种培育重大专项

2018ZX08011-04B

2020

10.11861/j.issn.1000-9841.2020.02.0212

大豆科学
黑龙江省农业科学院

大豆科学

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.641
ISSN：1000-9841
年,卷(期)：2020.39(2)
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