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发酵豆乳主要乳酸菌实时荧光定量PCR检测方法的建立

Establishment of Real-time Fluorescent Quantitative PCR Method for the Detection of Lactic Acid Bacteria in Fermented Soybean Milk

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为快速检测发酵豆乳中主要乳酸菌植物乳杆菌、副干酪乳杆菌含量,建立实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法.根据植物乳杆菌、副干酪乳杆菌保守区域设计特异性引物和探针,验证建立的实时荧光定量PCR法的特异性、灵敏度和重复性,并与国标法进行比较.结果 表明:引物特异性强,实时荧光定量PCR法特异性及重复性较好;植物乳杆菌和副干酪乳杆菌的检验灵敏度分别达到1.3×10-4和1.0×10-5 ng·μL-1.分别建立植物乳杆菌和副干酪乳杆菌标准菌株的实时荧光定量PCR检验法的标准曲线,得出R2分别为0.994 3和0.999 6,表明线性关系较好,可进行发酵豆乳中2种菌株含量的检测,测得供试发酵豆乳中植物乳杆菌与副干酪乳杆菌比例为4∶1.实时荧光定量PCR法测得发酵豆乳中乳酸菌总量为(5.5 ±0.26)×109 CFU·mL-1,国标法检测为(5.3±0.43)×109 CFU·mL-1,2种方法检测结果无差异(P＞0.05),表明建立的实时荧光定量PCR方法可快速、准确地检测出发酵豆乳中植物乳杆菌和副干酪乳杆菌的含量.

孙畅、安彬、杨柳、王国超、冯时荣、于寒松、王玉华、任大勇

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吉林农业大学食品科学与工程学院/国家大豆产业技术体系加工研究室,吉林长春130118

发酵豆乳 植物乳杆菌 副干酪乳杆菌 实时荧光定量PCR

现代农业产业技术体系建设专项吉林省教育厅“十三五”科学技术项目国家重点研发项目吉林农业大学大学生科技创新基金

CARS-04JJKH20190926KJ2017YFE01054002018088

2020

10.11861/j.issn.1000-9841.2020.03.0464

大豆科学
黑龙江省农业科学院

大豆科学

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.641
ISSN：1000-9841
年,卷(期)：2020.39(3)
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