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改良高盐高pH法提取大豆DNA

Extraction of Soybean DNA by Improved High Salt and High pH Method

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大豆除了含有大量的脂类和蛋白质外,还含有糖类和酚类物质,为解决难于从大豆中提取高质量DNA和传统提取方法耗时长的问题,本研究以中豆41与天隆一号的幼嫩叶片(V3)和成熟种子作为材料,对高盐低pH法进行改良,提高其裂解液pH值,同时结合冷冻裂解法缩短裂解时间,使用不同pH值醋酸钠纯化DNA,并与经典CTAB法进行比较,评价其提取DNA的效果及其应用范围.结果 表明,高盐高pH法对成熟种子的DNA提取效率较高,且蛋白与RNA污染少.CTAB法提取的DNA虽然完整性较高,但是耗时较长,蛋白与RNA污染较多.另外,高盐高pH法提取的DNA PCR扩增条带清晰,与常规CTAB法提取DNA扩增效果一致,但其DNA质量不能满足高通量测序要求.综上,改良的高盐高pH法是一种快速有效的大豆DNA提取方法,可满足常规分子试验的要求.

杨学珍、刘晓雪、宋健、乔虎平、邹娟、杨前玉、张帆、王俊

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长江大学农学院,湖北荆州434025

长江大学生命科学学院,湖北荆州434025

百迈客生物科技有限公司,北京101300

湖北省农业科学院,湖北武汉430064

湖北荃银高科种业有限公司,湖北荆州434025

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大豆 DNA提取 高盐高pH CTAB

湿地生态与农业利用教育部工程研究中心开放基金湿地生态与农业利用教育部工程研究中心开放基金

KF201808KF201910

2020

10.11861/j.issn.1000-9841.2020.04.0549

大豆科学
黑龙江省农业科学院

大豆科学

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.641
ISSN：1000-9841
年,卷(期)：2020.39(4)
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