摘要
为了鉴定大豆核因子YA(Nuclear Factor YA,NF⁃YA)与非生物胁迫的关系,本研究检测大豆干旱胁迫下GmNF⁃YA7和GmNF⁃YA8的表达量情况,克隆GmNF⁃YA7基因并构建植物表达载体,同时获得其转基因工程菌株.qRT⁃PCR结果显示,GmNF⁃YA7和GmNF⁃YA8均可以被干旱胁迫诱导表达,且GmNF⁃YA7对干旱胁迫的应答更明显.从大豆中克隆出GmNF⁃YA7基因,其位于大豆8号染色体上,编码含有336个氨基酸的蛋白质,预测分子量为37.06 kDa,pI6.11.GmNF⁃YA7蛋白氨基酸序列中含有1个CBF保守结构域.亚细胞定位预测结果显示,GmNF⁃YA7定位于细胞核中.蛋白系统进化分析表明GmNF⁃YA7蛋白与拟南芥AtNF⁃YA1蛋白的亲缘关系较近.利用限制性内切酶Nde I和Sal I将GmNF⁃YA7与植物表达载体pRI101连接并转化农杆菌EHA105,获得转基因工程菌株.
基金项目
黑龙江省大学生创新创业训练计划(202110232069)
黑龙江省普通本科高等学校青年创新人才培养计划(UNPYSCT?2017153)
齐齐哈尔大学研究生创新科研项目(YJSCX2020041)