大豆科学2022,Vol.41Issue(1) :43-48.DOI:10.11861/j.issn.1000-9841.2022.01.0043

干旱诱导基因GmNF?YA7克隆及植物表达载体构建

Cloning and Plant Expression Vector Construction of Drought⁃Induced GmNF⁃YA7

殷书欣 计俊杰 肖情 李铭杨 何佳琦 张军 翟莹
大豆科学2022,Vol.41Issue(1) :43-48.DOI:10.11861/j.issn.1000-9841.2022.01.0043

干旱诱导基因GmNF?YA7克隆及植物表达载体构建

Cloning and Plant Expression Vector Construction of Drought⁃Induced GmNF⁃YA7

殷书欣 1计俊杰 1肖情 1李铭杨 1何佳琦 1张军 2翟莹1
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作者信息

  • 1. 齐齐哈尔大学 生命科学与农林学院/抗性基因工程与寒地生物多样性保护黑龙江省重点实验室,黑龙江 齐齐哈尔161006
  • 2. 黑龙江省农业科学院 畜牧兽医分院,黑龙江 齐齐哈尔161005
  • 折叠

摘要

为了鉴定大豆核因子YA(Nuclear Factor YA,NF⁃YA)与非生物胁迫的关系,本研究检测大豆干旱胁迫下GmNF⁃YA7和GmNF⁃YA8的表达量情况,克隆GmNF⁃YA7基因并构建植物表达载体,同时获得其转基因工程菌株.qRT⁃PCR结果显示,GmNF⁃YA7和GmNF⁃YA8均可以被干旱胁迫诱导表达,且GmNF⁃YA7对干旱胁迫的应答更明显.从大豆中克隆出GmNF⁃YA7基因,其位于大豆8号染色体上,编码含有336个氨基酸的蛋白质,预测分子量为37.06 kDa,pI6.11.GmNF⁃YA7蛋白氨基酸序列中含有1个CBF保守结构域.亚细胞定位预测结果显示,GmNF⁃YA7定位于细胞核中.蛋白系统进化分析表明GmNF⁃YA7蛋白与拟南芥AtNF⁃YA1蛋白的亲缘关系较近.利用限制性内切酶Nde I和Sal I将GmNF⁃YA7与植物表达载体pRI101连接并转化农杆菌EHA105,获得转基因工程菌株.

关键词

大豆/GmNF⁃YA7/干旱响应/植物表达载体/转基因工程菌

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基金项目

黑龙江省大学生创新创业训练计划(202110232069)

黑龙江省普通本科高等学校青年创新人才培养计划(UNPYSCT?2017153)

齐齐哈尔大学研究生创新科研项目(YJSCX2020041)

出版年

2022
大豆科学
黑龙江省农业科学院

大豆科学

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:0.641
ISSN:1000-9841
被引量2
参考文献量6
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