复旦学报(自然科学版)2024,Vol.63Issue(6) :744-754.

大豆血红蛋白在马克斯克鲁维酵母中的重组表达及条件优化

Recombinant Expression and Optimization Conditions of Soybean Hemoglobin in K.marxianus

田甜 鲁心怡 曾俊源 周峻岗 余垚 吕红
复旦学报(自然科学版)2024,Vol.63Issue(6) :744-754.

大豆血红蛋白在马克斯克鲁维酵母中的重组表达及条件优化

Recombinant Expression and Optimization Conditions of Soybean Hemoglobin in K.marxianus

田甜 1鲁心怡 1曾俊源 1周峻岗 1余垚 1吕红1
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作者信息

  • 1. 复旦大学遗传工程国家重点实验室,上海 200438;复旦大学生命科学学院上海工业菌株技术研究中心,上海 200438
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摘要

本研究在马克斯克鲁维酵母中测试了不同来源血红蛋白表达情况,选择初始表达量最高的豆血红蛋白A(LBA)作为研究对象.探究了融合标签蛋白以及改变培养基条件对LBA表达的影响,结果显示培养基最佳pH为5.5,额外补充60 μmol/L氯化血红素使LBA可溶表达量提升了 21.1%,额外补充5 μmol/L Fe2+使LBA可溶表达量提升了 56.5%.最后在5 L发酵罐分批补料发酵中额外补充5 μmol/L Fe2+发酵72 h LBA产量最高,为1.97 g/L,较对照提高了 18.7%.

Abstract

In this study,different sources of hemoglobin expression were assessed in Kluyveromyces marxianus,with leghemoglobin A(LBA),exhibiting the highest initial expression levels,chosen for investigation.The impact of fusion tag proteins and altered culture conditions on LBA expression was explored,revealing an optimal pH of 5.5 in the culture medium.The addition of 60 pmol/L hemin chloride led to a 21.1%increase in soluble LBA expression,while supplementing with 5 μmol/L iron ions resulted in a 56.5%increase.Lastly,in a 5 L fermenter with batch feeding,supplementing with 5 μmol/L iron ions for 72 hours yielded the highest LBA production at 1.97 g/L,representing an 18.7%increase compared to the control.

关键词

豆血红蛋白/马克斯克鲁维酵母/血红素/蛋白表达

Key words

leghemoglobin/Kluyveromyces marxianus/Heme/protein expression

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出版年

2024
复旦学报(自然科学版)
复旦大学

复旦学报(自然科学版)

CSTPCD北大核心
影响因子:0.388
ISSN:0427-7104
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