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羔羊睾丸细胞酵母双杂交cDNA文库构建及鉴定

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为筛选与羊口疮病毒(OrfV)蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,构建了羔羊睾丸(LT)细胞酵母双杂交cDNA文库.采用Trizol法提取LT细胞总RNA,运用SMART技术经LD-PCR合成全长cDNA,再经同源重组法将pGADT7-Rec载体与cDNA共转化至Y187酵母菌株,利用营养缺陷型选择性培养基(SD/-Leu)筛选阳性克隆,并鉴定文库质量.结果显示:LT细胞酵母双杂交cDNA文库构建成功,其文库滴度为2.33×108 CFU·mL-1,文库容量达3.5×109 CFU;随机挑选34个单克隆进行PCR检测,插入片段大小为250～2000 bp,平均大小约为1000 bp,文库重组率达100％.由此表明,本文库达到高质量文库条件,可作为研究OrfV与宿主细胞间互作机制的生物材料.
Construction and identification of yeast two-hybrid cDNA library of lamb testicular cells

杨倩、包涛涛、鲜思美、张友、梁倩、顾庆林

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贵州大学动物科学学院,贵州 贵阳550025

贵州省黔东南州农业农村局,贵州 黔东南556000

贵州省动物疫病研究室,贵州 贵阳550025

羔羊睾丸细胞 酵母双杂交 cDNA文库 羊口疮病毒

贵州省科技计划

黔科合基础[2019]1113号

2022

10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2022.02.013

福建农林大学学报(自然科学版)
福建农林大学

福建农林大学学报(自然科学版)

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.582
ISSN：1671-5470
年,卷(期)：2022.51(2)
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