榨菜BjuFIP蛋白纯化及非生物胁迫下基因表达模式分析

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中文摘要：采用荧光定量PCR技术分析BjuFIP在不同非生物逆境胁迫下的表达模式.通过无缝克隆技术将BjuFIP的CDS序列构建到原核表达载体pGEX4T-1上,测序正确后转化大肠杆菌表达菌株BL21,对BjuFIP-GST蛋白进行体外诱导表达纯化.结果表明,BjuFIP-1显著受低温(4℃)、高温(37℃)和NaCl的诱导表达,BjuFIP-2显著受低温(4℃)、高温(37℃)、ABA、NaCl以及Mannitol的诱导表达,说明BjuFIP在调控榨菜响应非生物逆境胁迫过程中具有重要作用.SDS-PAGE电泳检测结果显示,在16、25和37℃以及1 mmol·L-1 IPTG诱导条件下,重组菌株均能够表达出分子质量约为55 ku的BjuFIP-GST融合蛋白,并且16℃诱导条件下,BjuFIP-GST蛋白较多以可溶性蛋白的形式存在,通过Glutathione Beads亲和层析柱纯化后,获得了大量纯度较好的BjuFIP-GST融合蛋白.BjuFIP显著受非生物逆境胁迫的诱导表达,在调控榨菜响应非生物逆境胁迫过程中具有重要作用,并且获得了大量纯度较高的BjuFIP-1-GST和BjuFIP-2-GST融合蛋白,为后期进一步探究BjuFIP在调控榨菜抗逆过程中的功能提供依据.

外文标题：Purification of protein BjuFIP in tuber mustard and its gene expression pattern under abiotic stress

作者：

颜论、陈国建、陈明飞、游经番、彭姣姣、程春红

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作者单位：

长江师范学院生命科学与技术学院,重庆408100

关键词：

榨菜 F-box蛋白 BjuFIP 基因表达蛋白纯化

基金：

项目编号：

cstc2018jcyjAX0628KJQN202101432CXQT21029

出版年：

2022

DOI：

10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2022.05.005

福建农林大学学报(自然科学版)

福建农林大学

福建农林大学学报(自然科学版)

CSTPCDCSCD北大核心

影响因子：0.582

ISSN：1671-5470

年,卷(期)：2022.51(5)

参考文献量2