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微波冻融法预处理用于酵母菌落PCR检测

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为实现酵母阳性转化子的高效筛选,亟需寻找一种快速、简便的菌落PCR方法用于酵母的分子遗传鉴定.以酿酒酵母为底盘微生物,转化重组质粒或染色体整合片段,挑选抗性筛选单菌落,采用不同预处理方法处理菌体以进行菌落PCR检测,并对结果进行分析.相比其他预处理方法,使用微波冻融法制备的模板进行菌落PCR检测,稳定性好、检测性能强,适用于短链DNA以及3000 bp以上目的片段的扩增;同时,该方法可进行毕赤酵母阳性克隆的筛选.表明微波冻融法通用性较强,制备的模板适合不同遗传背景以及基因操作方式下酵母菌落PCR检测.
Application of microwave freeze-thaw pretreatment in yeast colony PCR

李闯、彭志清、李寅琛、吴升山、林鹿、曾宪海

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厦门大学能源学院,福建 厦门361102

福建省生物质清洁高值化技术工程研究中心,福建 厦门361102

厦门市生物质清洁高值化利用重点实验室,福建 厦门361102

酿酒酵母 菌体预处理 菌落PCR 微波 冻融

2019YFB1503904

2022

10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2022.05.018

福建农林大学学报(自然科学版)
福建农林大学

福建农林大学学报(自然科学版)

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.582
ISSN：1671-5470
年,卷(期)：2022.51(5)
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