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灵芝LZ-8在烟草中的表达及产物特性的初步研究

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将从灵芝中克隆的LZ-8基因构建成原核表达质粒pET-30a-lz8,在大肠杆菌BL21中表达.SDS-PAGE表明其分子量约为14kD,与推算出的氨基酸分子量相似.经金属镍离子螯合柱纯化后的原核表达产物为单一条带,纯化产物免疫兔子获得了高效价的抗血清.将该基因亚克隆到植物双元表达载体中,用农杆菌介导的方法转化烟草.经ELISA实验定量测定,重组LZ-8达到了烟草可溶性蛋白的0.18%(每克新鲜叶片约含149.82μg LZ-8重组蛋白).体外活性检测表明,重组蛋白能有效地提高Vero E6细胞中肿瘤坏死因子(TNF-α)基因的mRNA转录水平,具有免疫调节相关功能.
Expression of LZ-8 from Garnodum lucidum in Transgenic Tobacco and Primary Study on Characteristic of Recombinant LZ-8

白杰英、曾林、刘毅、李彦舫、林忠平、胡鸢雷

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北京大学蛋白质工程与植物基因工程国家重点实验室,北京,100871

军事医学科学院,北京,100071

吉林大学植物科学学院,长春,130062

灵芝 LZ-8基因 免疫调节 转基因烟草

北京市科技新星计划项目

2005B05

2006

分子植物育种
海南省生物工程协会

分子植物育种

CSCD
影响因子：0.765
ISSN：1672-416X
年,卷(期)：2006.4(5)
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