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杜仲EuGT2基因的原核表达及蛋白纯化

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本研究以克隆所得杜仲(Eucommia ulmoides) EuGT2基因为基础,利用基因重组技术构建原核表达载体pMCSG19-EuG T2.重组载体转化到E.coli Rosetta (DE3)中,用0.05 mmol/L异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在37℃下诱导6h.使用镍-亚氨基二乙酸(Ni-IDA)亲和层析柱进行纯化,并用15％十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳进行检测.研究结果表明,杜仲EuGT2基因在E.coli Rosetta (DE3)中得到成功表达,重组蛋白表达形式为部分包涵体、部分可溶性蛋白.经SDS-PAGE凝胶电泳检测,在相对分子质量约56kD处有1条特异性蛋白条带,经质谱鉴定该特异性蛋白条带确为杜仲EuGT2蛋白.以上研究结果为后续研究杜仲糖基转移酶的功能提供了科学依据.
Prokaryotic Expression and Protein Purification of EuGT2 Gene from Eucommia ulmoides

冷阳、刘世会、赵懿琛、赵德刚

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贵州大学药学院,贵阳,550025

贵州大学,山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室,贵阳,550025

贵州大学茶学院,贵阳,550025

贵州省农业科学研究院,国家农业农村部DUS中心贵阳分中心,贵阳,550006

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杜仲(Eucommia ulmoides) 糖基转移酶 原核表达 蛋白纯化

本研究由国家自然科学基金国家转基因生物新品种培育科技重大专项贵州省科学技术基金

316600762016ZX08010003-009黔科合J字 [2015]2042共同资助

2020

分子植物育种
海南省生物工程协会

分子植物育种

CSTPCD北大核心
影响因子：0.765
ISSN：1672-416X
年,卷(期)：2020.18(10)
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