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均匀设计优化新疆主要葡萄品种ISSR-PCR反应体系

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为了建立适用于新疆主要葡萄品种的ISSR-PCR反应体系,本研究以新疆不同葡萄品种DNA为模板,采用均匀设计法,对影响ISSR-PCR体系的Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶等进行了U20(54)和U12(34)两轮优化,并在此基础上对退火温度及循环数进行了摸索.结果表明:在一定的浓度范围之内,Mg2+、dNTPs和引物浓度对体系的影响相对较小,而Taq DNA酶浓度对于整个ISSR-PCR体系的影响较大.优化后的25 μL 反应体系包含2.5 mmol/LMg2+,2.0 mmol/L dNTPs,1.0 μmol/L 引物,0.25 U Taq DNA 聚合酶及1.0 μmol/L模板DNA.最后运用优化体系对24份不同葡萄品种的DNA进行扩增验证,结果获得的DNA条带清晰,多态性比较丰富.说明优化后的ISSR-PCR体系可用于新疆不同葡萄种间亲缘关系和遗传多样性等领域的研究.
Uniform Design Optimizes ISSR-PCR Reaction System for Major Grape Varieties in Xinjiang

彭媛媛、高展、艾克拜尔·毛拉、周龙

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新疆农业大学林学与园艺学院,乌鲁木齐, 830052

葡萄 ISSR-PCR 体系优化 均匀设计

新疆维吾尔自治区科技计划重大专项自治区级研究生创新项目新疆农业大学2612创新团队新疆维吾尔自治区园艺学重点学科项目

2017A01001XJ2019G161XJAU2015282016-10758-3

2021

10.13271/j.mpb.019.000539

分子植物育种
海南省生物工程协会

分子植物育种

CSTPCD北大核心
影响因子：0.765
ISSN：1672-416X
年,卷(期)：2021.19(2)
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