建立适宜金龙胆草DNA的SRAP-PCR扩增体系,为金龙胆草分子标记打下基础.针对常规银染方法从是否固定、银染液组成、银染时间、显影液组成等方面优化了金龙胆草SRAP扩增产物的检测方法,同时探索了金龙胆草SRAP-PCR反应程序,并对金龙胆草SRAP-PCR反应体系的各影响因子进行优化.结果建立了一个银染步骤快速、高效的银染检查方法,筛选的退火温度为51.3℃,最佳SRAP-PCR反应体系(15 μL)为:DNA 40 ng,引物浓度0.7 μmol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,Mg2+1.9 mmol/L,Taq聚合酶0.6 U,10×buffer 2 μL,双蒸水补足.该程序和体系能很好地满足金龙胆草基因组SRAP扩增的要求,SRAP标记应用于金龙胆草遗传研究是可行的.
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