摘要
目的探讨过表达转录因子E2F1对小脑颗粒神经元凋亡的影响.方法构建pE2F1表达质粒,转染293细胞验证其表达,双报道基因系统检测其转录活性.体外培养小脑颗粒神经元,钙磷法转染pE2F1表达,转染pcDNA空载体组作为对照,于转染12、24、48 h后运用Hoechst 33258染色检测转染细胞的核固缩率(即凋亡率);转染pE2F1和pcDNA 48 h后的小脑颗粒神经元进行高钾和低钾处理12 h,统计细胞凋亡率.结果成功构建pE2F1表达质粒,且证实该质粒具有转录活性.与转染pcDNA空载体组比较,转染pE2F1后不同时间点小脑颗粒神经元的凋亡率差异无统计学意义(P>0.05).pE2F1转染组和pcDNA转染组高钾处理后的凋亡率分别为(12±4)%和(11±3)%,差异无统计学意义(P>0.05);低钾处理后的凋亡率分别为(42±3)%和(30±2)%,差异有统计学意义(P<0.05).结论过表达E2F1对小脑颗粒神经元的凋亡无明显影响,但抑制低钾处理诱导的小脑颗粒神经元凋亡.
基金项目
广州市医药卫生科技一般引导项目(2009-YB-154)