首页|人源抗C3d单链抗体的筛选与鉴定

人源抗C3d单链抗体的筛选与鉴定

Screening and identification of human anti-C3d single chain antibodies

扫码查看
原文链接
  • NETL
  • NSTL
  • 万方数据
目的 从噬菌体展示单链抗体库中筛选获得人源抗人C3d单链抗体,并评价其结合活性.方法 以人C3d重组蛋白包被免疫管,对噬菌体展示单链抗体库进行固相筛选;C3d包被量逐轮降低,洗涤强度逐轮增强.采用ELISA对筛选产出进行鉴定,选择阳性克隆,测序确定阳性单链抗体基因.分子克隆构建单链抗体的真核表达载体,转染HEK293-F细胞进行真核表达,镍柱亲和纯化获得单链抗体.采用生物膜干涉技术(BLI)检测单链抗体与重组人C3d的结合活性.结果 经3轮筛选获得3个特异性结合C3d的噬菌体单链抗体(A1、A3和B6),重组表达获得高纯度的单链抗体蛋白,与C3d重组蛋白结合活性为22.7～171 pmol/L.结论 获得了全新的高亲和力人源抗人C3d单链抗体.

赵信平、杜昕颖、徐银凤、韩冬、赵江云、郭卫光、谢靖、李环、董灏、刘肖、杜鹏、贾雷立

展开 >

100071 北京,中国人民解放军疾病预防控制中心

100071 北京,军事科学院军事医学研究院生物工程研究所

噬菌体展示抗体库 单链抗体 C3d 亲和力

国家重点研发计划

2018YFC1200101

2020

10.13220/j.cnki.jipr.2020.09.011

国际药学研究杂志
军事医学科学院毒物药物研究所，中国药学会

国际药学研究杂志

CSTPCD
影响因子：0.806
ISSN：1674-0440
年,卷(期)：2020.47(9)
  • 1