摘要
目的 探讨银杏花提取物及其中化学成分对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)铁死亡的抑制作用,筛选出有效部位和有效化合物,为成药性提供初步研究数据.方法 将银杏花70％乙醇提取物依次用不同有机溶剂萃取,得到4个萃取部位.利用erastin处理HUVEC细胞建立血管内皮细胞铁死亡模型,对4个萃取部位及前期从乙酸乙酯部位分离得到的9个化合物应用CCK-8法进行抗血管内皮细胞铁死亡活性筛选,并通过Western印迹法(WB)对其作用机制进行初步探讨.结果 erastin诱导的HUVEC细胞死亡可被阳性药ferrostatin-1(Fer-1)逆转,是理想的血管内皮细胞铁死亡模型.银杏花总提物组能抑制eras-tin诱导的HUVEC细胞铁死亡,细胞存活率较erastin模型组明显提高(P<0.05),且乙酸乙酯部位组细胞存活率提高最多,为其活性部位.进一步对活性部位中分离获得的化合物进行活性筛选,结果表明,山柰酚、芹菜素、木犀草素及山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷在10µmol/L时均能较模型组显著提高细胞存活率(P<0.01),其药效接近或超过Fer-1水平,其中木犀草素可使铁死亡细胞恢复至正常水平.WB结果显示,同模型组比,木犀草素可下调酰基辅酶A合成酶长链家族成员4和上调谷胱甘肽过氧化酶4的表达(P<0.01).结论 筛得银杏花乙酸乙酯部位为其抗血管内皮细胞铁死亡活性部位,木犀草素为其活性化合物,本研究将为抗血管炎症损伤药物研发提供新靶点和新的治疗策略.
基金项目
国家"重大新药创制"科技重大专项项目(2018ZX09733-003)
国家重点研发计划干细胞及转化研究专项(2017YFA0105303)
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