摘要
目的 建立LC-MS/MS方法检测环鸟苷酸-腺苷酸(cGAMP)含量.方法 选用程序梯度法,色谱柱为PC HILLIC色谱柱(2.0 mm×150.0 mm,5μm),流动相A为10 mmol/L甲酸铵水溶液(含0.1％甲酸),流动相B为0.1％甲酸乙腈溶液,流速为0.4 ml/min,柱温为30℃,进样量为10μl.质谱优化条件:多反应监测(mμltiple reaction monitoring,MRM)模式,cGAMP[M+H]+为675.22,锥孔电压56 V,碰撞能量为20 eV.结果 cGAMP在1～1000 ng/ml浓度范围内线性关系良好(n=9,r2=0.9999);方法定量限为1 ng/ml,批间/批内精密度均<20％,批间准确度为83％～96％,批内准确度87％～95％;方法提取回收率为80％～90％,基质效应<10％.结论 该检测方法简单、快速、灵敏、准确,适用于细胞或体外cGAS酶合成cGAMP定量分析.
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