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人源Parkin蛋白在大肠杆菌BL-21(DE3)中的异源表达和纯化

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目的 在大肠杆菌中异源表达和纯化人源Parkin蛋白.方法 构建带有人源Parkin基因的克隆载体,测序保证Parkin基因序列正确后,构建异源表达载体pET-28a/Parkin;在Escherichia coli BL21(DE3)中诱导人源Parkin蛋白过表达,采用镍亲和色谱纯化人源Parkin蛋白,用Western印迹(WB)和荧光分光光度法评价人源Parkin蛋白活性.结果 人源Parkin蛋白在E.coli BL21(DE3)中获高表达,经镍亲和色谱纯化后除去了大量杂蛋白,得到富集;WB和荧光分光光度法检测均证实异源表达的人源Parkin蛋白具有生物活性.结论 通过异源表达技术获得高纯度的且具有生物活性的人源Parkin蛋白,可用于Parkin调节剂的快速筛选与研究.
Heterologous expression and purification of human Parkin protein in Escherichia coli BL-21(DE3)

李凤娇、顾雯、李艳芹、穆健康、杨兴鑫、俞捷

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650500 昆明,云南中医药大学中药学院,昆明市代谢性疾病中医药防治重点实验室

Parkin 泛素化 异源表达 蛋白纯化 检测活性

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2020

10.13220/j.cnki.jipr.2020.12.017

国际药学研究杂志
军事医学科学院毒物药物研究所，中国药学会

国际药学研究杂志

CSTPCD
影响因子：0.806
ISSN：1674-0440
年,卷(期)：2020.47(12)
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