摘要
为建立一种能够区分鸽新城疫病毒(NDV)野毒株与常用新城疫疫苗株La Sota的重组酶介导的等温扩增方法(RAA),本研究针对基因Ⅵ型鸽源NDV和La Sota的NP基因设计出1 对特异性引物,经过优化引物浓度、反应时间、反应温度,建立了能够区分鸽NDV野毒株与La Sota的RAA检测技术.对其特异性、敏感性和重复性进行测试,并应用建立的方法检测了 45 份临床样品.结果显示:该技术在 15℃～39℃的恒温条件下,可于15 min内完成对目标基因的扩增;对禽支原体、大肠杆菌、沙门氏菌、传染性支气管炎病毒、禽流感病毒和衣原体等常见病原的检测结果均为阴性;重组质粒标准品检测下限为39.5 copies/反应;45 份临床病死鸽样品的检测,检出 28 份阳性,与常规PCR方法的检测结果一致.本研究结果说明建立的RAA方法可应用于临床样品的快速检测.
基金项目
广西重点研发计划项目(桂科AB 23 026 082)
校企合作项目(202 201 277)
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