摘要
基于大肠杆菌原核表达的G重组蛋白缺少糖基化修饰,诱导机体产生中和抗体的能力较弱.为制备G蛋白多克隆抗体,针对G蛋白抗原Ⅳ区第 251 位氨基酸的中和抗原表位,以日本 RABV疫苗株 RC-HL的G蛋白序列为模板,设计了含有17 个氨基酸的多肽序列MQTSDETKWCPPDQLVN(G17),合成后偶联KLH蛋白,与弗氏佐剂乳化后免疫小鼠,采集血液分离血清获得抗G蛋白多克隆抗体.实验显示,制备的多克隆抗体效价在1∶500 以上,在 1∶200 的稀释度下,可以对原核表达的G重组蛋白、真核表达的G重组蛋白进行Western Blot检测.基于狂犬病病毒G蛋白抗原位点Ⅳ区制备获得的抗G蛋白多克隆抗体具有反应性好及特异性强的特点,能够用于检测G重组蛋白,为进一步研究G蛋白功能、研发单抗和设计疫苗打下良好基础.
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