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家蝇u93基因的原核表达与体外抗菌活性检测

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目的:构建家蝇u93基因原核表达体系,检测重组表达产物的体外抗菌活性.方法:采用生物信息学方法,分析u93基因编码蛋白的理化特性;将前期构建的pET29a-u93重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21/DE3中,以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白并通过SDS-PAGE对表达产物进行分析;纯化重组蛋白,采用微量稀释法检测u93重组蛋白的体外抗菌活性.结果:生物信息学分析显示,u93编码基因开放阅读框全长363 bp,共编码120个氨基酸,理论分子量为13.35 kD,等电点为7.52,信号肽位于1～20位氨基酸之间;u93重组蛋白在大肠杆菌BL21/DE3中主要以包涵体形式表达,重组蛋白的相对分子质量与理论值相一致;u93重组蛋白对白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC)为21 mg/L、对近平滑念珠菌MIC为12.5 mg/L、对克柔念珠菌MIC为12.5 mg/L、对热带念珠菌MIC为12.5 mg/L,但不能抑制金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌的生长繁殖.结论:成功构建u93原核表达系统,重组表达的u93蛋白对念珠菌具有较强的抑杀活性.
Prokaryotic Expression of Musca Domestica u93 Gene and Antibacterial Activity in Vitro

马素贞、王涛、龙慧玲、国果、杨阳、常振策、王兵、吴建伟

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贵州医科大学寄生虫学教研室,贵州贵阳550025

贵州医科大学微生物学教研室,贵州贵阳550025

贵州医科大学贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室,贵州贵阳550025

贵州医科大学生物技术教研室,贵州贵阳550025

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家蝇 u93基因 原核表达 抗菌活性

国家自然科学基金贵阳市科技局-贵州医科大学联合基金国家科技支撑计划

No81360254GY2015-232011BAC06B12

2018

贵州医科大学学报
贵阳医学院

贵州医科大学学报

CSTPCD
影响因子：0.827
ISSN：2096-8388
年,卷(期)：2018.43(9)
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