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一种新的空肠弯曲菌外膜囊泡提取方法的建立

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空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)是其在生长过程中分泌到细胞外的球状小泡,主要含有外膜蛋白及一些周质空间的物质,对细菌的生存、定植、细菌与宿主细胞间的交流及致病机制发挥重要的作用.因此,开发一种高效提取方法是研究空肠弯曲菌OMVs生物学功能的关键.该研究发现在微需氧条件下,使用MH培养基培养空肠弯曲菌15 h后提取OMVs最为合适.在最优条件下,采用超滤浓缩法从菌液中提取OMVs,并使用0.22μm的微孔滤头进一步过滤提取物除去鞭毛等杂质.为了表征所提取的OMVs质量,首先使用透射电镜技术,发现所提取的OMVs具有典型形态,大小在50～300 nm之间,所含杂质较少.SDS-PAGE电泳结果表明OMVs内部含有大量蛋白,含量可达40.50 mg/mL.最后利用外膜蛋白抗体成功证明所提取的物质的主要成分为OMVs.该研究成功建立了一种从液体培养基中提取空肠弯曲菌OMVs的提取体系,多种分析方法证明其提取效率高、质量较好,适用于后续空肠弯曲菌OMVs生物功能相关研究.
A New Method for Extracting Outer Membrane Vesicles of Campylobacter jejuni

聂翔、王涓、吴清平、张菊梅、马国祥、汪智、唐胜君、潘琪琪、张伟培、肖铠姗

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华南农业大学食品学院,广东广州 510642

广东省科学院微生物研究所,华南应用微生物国家重点实验室,广东省微生物安全与健康重点实验室,广东广州 510070

华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州 510006

空肠弯曲菌 外膜囊泡 超滤浓缩法

国家自然科学基金国家重点研发计划项目广东省重点领域研发计划广东省重点领域研发计划华南应用微生物国家重点实验室开放基金

318016502017YFC16012002018B0202050012018B020205002SKLAM004-2016

2021

10.13982/j.mfst.1673-9078.2021.12.0282

现代食品科技
华南理工大学

现代食品科技

CSTPCD北大核心
影响因子：1.07
ISSN：1673-9078
年,卷(期)：2021.37(12)
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