摘要
为构建牛支原体融合膜蛋白原核表达载体,使用SOE-PCR技术融合M27、M498基因并扩增融合基因M27-498,利用基因克隆技术构建pMD19-T-M27-498 双基因克隆载体,通过亚克隆技术将融合基因M27-498克隆至表达载体pColdⅠ,构建pColdⅠ-M27-498 原核表达载体.结果:SOE-PCR产物的电泳条带约 1 167 bp,与融合基因M27-498片段相符;经PCR、双酶切、测序鉴定,重组质粒pMD19-T-M27-498、pColdⅠ-M27-498 的DNA均包含融合基因M27-498.结论:pColdⅠ-M27-498 原核表达载体构建成功,可为牛支原体亚单位疫苗的研发奠定基础.
基金项目
大学生创新创业训练计划(贵大[省]创字2022[099]号)
贵州省科技计划(黔科合支撑[2021]一般161号)
贵州省优秀青年科技人才项目(黔科合平台人才[2021]5646号)