摘要
为了构建羊口疮病毒ORF116基因的真核表达载体,以ORFV-JS株基因组为参考序列,PCR特异性扩增ORF116基因;将ORF116基因与pEGFP-N1 载体连接后转化大肠杆菌感受态细胞,菌液PCR和测序筛选鉴定阳性单克隆;阳性克隆扩大培养后提取pEGFP-ORF116 重组质粒,并进行酶切鉴定.结果:ORF116基因PCR产物为 696 bp;菌液PCR共得到 3 个阳性单克隆,测序结果正确;pEGFP-ORF116 重组质粒双酶切得到 696 bp的ORF116基因片段.结论:试验成功构建了羊口疮病毒ORF116基因的真核表达载体,为进一步研究该基因的表达及编码蛋白的功能奠定了基础.
基金项目
国家级大学生创新创业训练计划(202210657156)
动物医学创新型人才的实验技能培训-"羊口疮病毒114蛋白的真核表达与亚细胞定位研究"贵州大学实验室开放项目(SYSKF2024-028)
贵州省科学技术基金(自然科学)(黔科合基础-ZK[2022]一般093)
NETL
NSTL
万方数据