为构建牛源ISG15基因的过表达载体,以GenBank中牛源ISG15基因序列作为参考序列设计1对合成引物,通过扩增ISG15基因,构建pMD-18T-ISG15克隆质粒和pEGFP-N1-ISG15 表达质粒,转染MDBK细胞并进行间接免疫荧光(IFA)检测.结果:经PCR扩增、测序验证,pEGFP-N1-ISG15 重组表达质粒构建成功;IFA检测显示,转染pEGFP-N1-ISG15 重组质粒的MDBK细胞中有明显绿色荧光信号.结论:试验成功构建了牛源ISG15基因的过表达载体,并在MDBK细胞中成功表达.
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