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鼠源抗VISTA重组蛋白单克隆抗体的制备

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为了对VISTA抗体药物的研发奠定基础,试验利用真核表达系统表达VISTA胞外段重组蛋白,并采用Ni-NTA 亲和层析法纯化该蛋白,用其作为免疫原免疫BALB/c小鼠后,经过细胞融合和杂交瘤单克隆筛选,制备VISTA单克隆抗体.结果:通过真核表达系统成功表达VISTA重组蛋白,其分子量约 70 kD.用纯化VISTA蛋白免疫小鼠后血清效价达到 1∶51 200,通过杂交瘤技术获得 1 株可稳定分泌抗VISTA单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞 4H7,经抗体亚型鉴定,制备的VISTA单克隆抗体为IgG1 亚型.结论:利用真核表达系统表达及纯化VISTA重组蛋白,并通过杂交瘤技术成功制备了鼠源抗VISTA单克隆抗体,纯度高,为IgG1 亚型.

旷怡、仝爱平

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贵州省天然产物研究中心,贵州 贵阳 550014

四川大学生物治疗国家重点实验室,四川 成都 610064

免疫检查点 VISTA 重组蛋白 杂交瘤技术 单克隆抗体

贵州省科技厅一般项目

黔科合基础-ZK[2022]一般297

2024

贵州畜牧兽医
贵州省畜牧兽医研究所,贵州省农委畜牧兽医管理办公室,贵州省畜牧兽医学会

贵州畜牧兽医

影响因子：0.153
ISSN：1007-1474
年,卷(期)：2024.48(5)