摘要
为了对VISTA抗体药物的研发奠定基础,试验利用真核表达系统表达VISTA胞外段重组蛋白,并采用Ni-NTA 亲和层析法纯化该蛋白,用其作为免疫原免疫BALB/c小鼠后,经过细胞融合和杂交瘤单克隆筛选,制备VISTA单克隆抗体.结果:通过真核表达系统成功表达VISTA重组蛋白,其分子量约 70 kD.用纯化VISTA蛋白免疫小鼠后血清效价达到 1∶51 200,通过杂交瘤技术获得 1 株可稳定分泌抗VISTA单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞 4H7,经抗体亚型鉴定,制备的VISTA单克隆抗体为IgG1 亚型.结论:利用真核表达系统表达及纯化VISTA重组蛋白,并通过杂交瘤技术成功制备了鼠源抗VISTA单克隆抗体,纯度高,为IgG1 亚型.
基金项目
贵州省科技厅一般项目(黔科合基础-ZK[2022]一般297)
维普
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