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大豆二酰甘油酰基转移酶基因GmDGAT1A启动子的克隆与功能分析

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二酰甘油酰基转移酶(DGAT)是催化三酰甘油生物合成的关键酶,在三酰甘油的合成和积累过程中具有重要调控作用.为了研究大豆DGAT基因表达调控的分子机制,以大豆品种科丰1号为材料,通过PCR方法对Gm-DGAT1A的启动子(promoter-GmDGAT1A,pGmDGATIA)进行克隆,并通过转化拟南芥和GUS组织定位研究其功能.结果表明:以大豆叶片DNA为模板,成功克隆到GmDGAT1A基因ATG上游2192 bp启动子序列.序列分析表明,pGm-DGAT1A除具有启动子所必需的TATA-box和CAAT-box等基本顺式作用元件外,还含有多个响应于光、赤霉素和脱落酸等顺式作用元件.以GUS为报告基因,成功构建了植物表达载体pCAMBIA1381Z-pGmDGAT1A,并转化野生型拟南芥获得转基因植株.对转基因拟南芥植株进行PCR检测,能扩增到2192 bp目标条带,表明已获得含有pGmDGAT1A的转基因拟南芥阳性植株.GUS组织化学染色结果显示,转基因拟南芥幼苗的叶脉和根染色较深,但是主根和侧根的根尖部分未染色;成熟期转基因拟南芥植株的根、叶脉以及角果内的隔膜和珠柄染色较深,茎和发育的种子未染色,表明pGmDGAT1A驱动的GUS主要在转基因拟南芥的根、叶脉以及角果内的隔膜和珠柄中表达.综上,克隆的大豆GmDGAT1A启动子具有活性,能够驱动下游目标基因的表达,有望应用于转基因育种.
Cloning and Functional Analysis of Promoter of Diacylglycerol Acyltransferase Gene GmDGAT1A in Soybean

晁毛妮、胡喜贵、张晋玉、王润豪、温青玉、孙新凯、黄中文

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河南科技学院,现代生物育种河南省协同创新中心,河南 新乡 453003

河南省农业科学院,河南 郑州 450002

大豆 二酰甘油酰基转移酶(DGAT) 启动子 油脂 GUS

国家自然科学基金河南省科技攻关计划河南省博士后基金河南省研究生教育改革与质量提升工程项目

316013471921021100241902042豫学位[2018]23号

2020

10.7668/hbnxb.20190821

华北农学报
河北,北京,天津,山西,河南,内蒙古六省市农科院农学会

华北农学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.067
ISSN：1000-7091
年,卷(期)：2020.35(4)
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