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海藻酸钙固定化重组暗紫贝母PAL蛋白

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利用IPTG诱导含暗紫贝母(Fritillaria unibracteata)苯丙氨酸解氨酶FuPAL-pET28a的重组大肠杆菌BL21菌株,经Ni2+亲和层析与质谱鉴定获得纯度较高的FuPAL重组蛋白.以海藻酸钙凝胶为固定化介质,包埋FuPAL重组蛋白.单因素考察试验与统计学分析结果表明,海藻酸钠质量分数、CaCl2浓度、固定化时间、海藻酸钠与酶质量比影响固定化酶的活性,它们的最优条件分别为3.5%、1 g/L、4 h与40 000∶1.进一步采用L9(34)正交试验设计,确定影响因素的重要性从高到低依次为CaCl2浓度、海藻酸9钠质量分数、固定化时间、海藻酸钠与酶质量比,最佳的固定化条件是CaCl2浓度为2 g/L,海藻酸钠质量分数为4%,固定化时间为3h,海藻酸钠与酶质量比为40 000∶1.在该优化工艺条件下,制备的固定化酶凝胶颗粒呈较好的圆整性和均一性,相对酶活力达到最高,为68.53%.该固定化方法具有试验成本低、工艺流程简单、反应条件温和的特点,应用前景较好,并为固定化FuPAL蛋白的制备优化提供了重要的理论基础.

李响、童婧莹、张鑫薇、刘玢、秦余、唐婕、苗祖源、许天成、廖海、周嘉裕

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西南交通大学生命科学与工程学院,成都 610031

海藻酸钙 暗紫贝母PAL蛋白 暗紫贝母PAL重组酶 固定化 苯丙酮尿症

成都市科技局项目中央高校医工结合项目四川省中医药管理局项目国家级大学生创新创业训练计划资助项目西南交通大学个性化实验项目

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2024

中南农业科技
湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 湖北省畜牧局 湖北省农业科学院农业测试与科技信息中心

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影响因子：0.152
ISSN：
年,卷(期)：2024.45(7)
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