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抗肿瘤多肽Peptide30的纯化及抗肿瘤活性研究

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目的 采用镍离子亲和层析从含有PTYB21-His-p30质粒的菌株中提取抗肿瘤多肽30肽,即Peptide30,检测Peptide30对肿瘤细胞和实体瘤的抗肿瘤活性.方法 培养PTYB21菌株,IPTG诱导表达,经超声离心等方法后,取其上清(含30肽融合蛋白),DTT裂解目的蛋白后,经镍柱层析分离Peptide30肽后G25凝胶过滤层析除盐,然后检测Peptide30肽浓度和纯度,经细胞克隆形成实验和动物实验检测Peptide30的抗肿瘤活性.结果 经镍柱亲和层析纯化的Peptide30浓度为:451 μg/mL,纯度为:95.5%;细胞克隆形成实验结果表明Peptide30肽能够显著降低U251胶质瘤细胞和HGC27胃癌细胞的存活率,动物实验结果显示:Peptide30的抑瘤率达到63.49%,高于41肽抑瘤率.结论 加入His标签的PTYB21-30肽质粒转入大肠埃希菌Rosetta(DE3) pLysSS后,经诱导表达及镍柱亲和层析纯化后能够得到高纯度的抗肿瘤多肽Peptide30,该Peptide30具有较好的体外、体内抗肿瘤活性.
Purification and anti-tumor activity of anti-tumor peptides: Peptide30

郑天虎、刘兴汉、赵玲、王立新

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哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,黑龙江哈尔滨150081

哈尔滨医科大学药学院药理学教研室,黑龙江哈尔滨150081

抗肿瘤多肽 蛋白质纯化 镍离子亲和层析 抗肿瘤活性

黑龙江省自然科学基金面上项目

H2015014

2020

哈尔滨医科大学学报
哈尔滨医科大学

哈尔滨医科大学学报

CSTPCD
影响因子:1.117
ISSN:1000-1905
年,卷(期):2020.54(2)
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