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BMP-2基因修饰的复层脱落乳牙牙髓干细胞膜片的体外构建研究

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目的 探讨BMP-2基因修饰的复层乳牙牙髓干细胞膜片的体外构建方法及基本生物学特性.方法 分离培养脱落乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHEDs),并通过转染BMP-2基因进一步提高SHEDs的成骨能力,随后以SHEDs为种子细胞构建复层细胞膜片.利用倒置显微镜对细胞转染效率及成骨能力进行观察;通过HE染色和Masson染色对细胞膜片的结构和胶原分布进行检测;以免疫组织化学染色检测BMP-2蛋白的表达情况.结果 体外分离培养了SHEDs,并证实其具有多向分化潜能.采用富含维生素C的培养基连续培养10 d左右即可获得白色膜样结构,该细胞膜片具有较好的弹性,叠加两层单层膜片继续培养24 h可构建具有良好韧性和机械性能的复层膜片.HE染色及Masson染色观察发现SHEDs膜片由多层细胞及丰富的细胞外基质组成.免疫组织化学染色示SHEDs膜片可表达BMP-2蛋白.结论 BMP-2基因修饰的SHEDs体外采用富含维生素C的培养基连续培养可构建具有良好机械性能的复层细胞膜片并持续表达BMP-2蛋白,该膜片将为牙周骨缺损修复提供一种新思路.
Construction of a BMP-2 gene modified bilayer human exfoliated deciduous dental pulp stem cell sheet in vitro

李威、金晗、冯冬菲、周惠、谢琪、田素宝

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哈尔滨市儿童医院口腔科,黑龙江哈尔滨150010

哈尔滨医科大学附属第二医院硬组织发育与再生实验室,黑龙江哈尔滨150081

牙周骨缺损 脱落乳牙牙髓干细胞 细胞膜片 骨形成蛋白2

国家自然科学基金青年基金哈尔滨市应用技术研究与开发项目

815008162017RAQXJ237

2020

哈尔滨医科大学学报
哈尔滨医科大学

哈尔滨医科大学学报

CSTPCD
影响因子:1.117
ISSN:1000-1905
年,卷(期):2020.54(3)
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