目的 观察中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)高凝状态中的作用,为探讨DN的发病机制及靶向治疗提供线索和依据.方法 选取2018年6月～2019年10月于哈尔滨医科大学附属第一医院就诊的DN患者36例,按24 h尿白蛋白排泄率(albumin excretion rate,AER)分为 3 组:Mo 组(AER＜30 mg/24 h)、Mi 组(AER 30～300 mg/24 h)和Ma组(AER＞300 mg/24 h),每组12例,另设健康对照组20例.采集空腹外周静脉血,分离血浆及中性粒细胞后,检测各组血浆中胞外游离DNA(cell free-DNA,cf-DNA)、核小体、髓过氧化物酶-DNA复合物(myeloperoxidase-DNA complex,MPO-DNA)及中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophilic elastase,NE)的含量;用DN血浆及不同浓度葡萄糖溶液体外刺激健康的多形核白细胞(polymorphonuclear,PMN)提取NETs,用免疫荧光法检测各组NETs生成情况;用佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)分别刺激对照组及DN组分离的PMN后测定凝血时间、纤维蛋白生成以及凝血酶原酶复合物产生情况,观察NETs生成与凝血的相关性.结果 与健康对照组比较,DN组血浆中cf-DNA、核小体、MPO-DNA及NE水平明显增多(P＜0.05),且Ma组较Mi组升高更明显(P＜0.01).DN血浆及5 mmol/L、25 mmol/L葡萄糖溶液可激活PMN产生NETs,而2.5 mmol/L低糖溶液不能激活PMN产生NETs.与健康对照组比较,DN组凝血时间明显缩短,纤维蛋白及凝血酶复合物生成明显增加(P＜0.05).结论 DN中高糖可刺激PMN活化产生NETs,激活凝血途径促进血液高凝,产生纤溶抵抗作用,加重肾脏损伤.
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