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Slfn5基因条件性敲除小鼠模型的构建

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目 的 应用CRISPR/Cas9技术构建Slfn5基因条件性敲除小鼠模型并进行初步表型鉴定,为Slfn5功能及机制研究提供动物模型.方法 根据Slfn5的基因结构,选择外显子3作为敲除区域(flox区域).采用受精卵同源重组的方式,将针对Slfn5基因设计的gRNA(guide RNA)、Cas9 mRNA以及含有flox区域的同源重组质粒显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中并获得F0代小鼠.PCR扩增及测序鉴定阳性的F0代小鼠与C57BL/6J野生型小鼠交配,获得F1代Slfn5 flox/+杂合子小鼠.此杂合子小鼠自交,得到F2代Slfn5flox/flox纯合子小鼠.最后,将F2代Slfn5flox/flox纯合子小鼠与Dppa3-Cre鼠杂交,得到flox纯合且Cre阳性小鼠即Slfn5敲除小鼠.结果 获得Slfn5敲除小鼠模型,PCR及测序鉴定为Slfn5基因条件性敲除小鼠.与野生型小鼠相比,Slfn5基因敲除的小鼠血常规中淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞数量明显增多(P＜0.05).结论 应用CRISPR/Cas9技术成功建立Slfn5基因敲除小鼠动物模型,为研究Slfn5在乳腺癌和免疫系统的生物学功能及作用机制奠定实验基础.
Construction of a Slfn5 conditional knockout mouse model

李婧铱、吕昌莲、贾迪、顾雪锋、万国庆、赵炜明

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齐齐哈尔医学院医学技术学院,黑龙江齐齐哈尔161006

上海健康医学院分子影像学重点实验室,上海201318

黑龙江中医药大学基础医学院,黑龙江哈尔滨150040

基因敲除 CRISPR/Cas9技术 Schlafen家族成员-5

国家自然科学基金资助项目中央支持地方高校发展改革资金人才培养支持计划项目黑龙江省普通高等学校青年创新人才培养计划项目

81772829UNPY-SCT-2020084

2022

10.20010/j.issn.1000-1905.2022.06.0551

哈尔滨医科大学学报
哈尔滨医科大学

哈尔滨医科大学学报

CSTPCD
影响因子：1.117
ISSN：1000-1905
年,卷(期)：2022.56(6)
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