摘要
为了比较鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)Ⅰ型与Ⅱ型Cap蛋白免疫原性,试验分别选取DuCV-BJ株(HM162350.1,DuCVⅠ型)和DuCV-FJ株(EF370476.1,DuCVⅡ型)Cap基因作为参考序列,进行抗原表位预测,密码子优化与合成,克隆至pET-28a载体,将重组质粒转化至BL21(DE3)宿主菌中进行诱导表达,获得重组蛋白.重组蛋白纯化后免疫Balb/c小鼠,检测免疫小鼠体内特异性抗体IgG水平和细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)、IL-4.结果表明:DuCV-BJ株和DuCV-FJ株Cap蛋白平均抗原指数分别为1.727和0.505,抗原表位区域存在差异.密码子优化后,密码子适应指数(CAI)由原来的0.89增长至1.00.重组质粒pET28a-BJ和pET28a-FJ均在大肠杆菌中成功表达;重组蛋白rCap-BJ和rCap-FJ免疫Balb/c小鼠后,均可诱导小鼠产生特异性抗体IgG,三免后rCap-FJ组、rCap-BJ组IgG水平极显著高于对照组(P<0.01),但rCap-FJ组与rCap-BJ组差异不显著(P>0.05);rCap-FJ组、rCap-BJ组IFN-γ、IL-2、IL-4水平极显著高于对照组(P<0.01).说明重组蛋白rCap-BJ和rCap-FJ均能够刺激Balb/c小鼠机体产生特异性免疫应答,具有良好的免疫原性.
基金项目
辽宁省教育厅基本科研面上项目(LJKZ0799)
辽宁省教育厅科学技术研究项目(JYTJCZR 2020076)
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