地衣芽孢杆菌谷氨酸消旋酶基因克隆、原核表达及生物信息学分析

Cloning,prokaryotic expression and bioinformatics analysis of glutamic acid racemase gene of Bacillus licheniformis

邬旭龙 ¹杨敏 ¹肖璐 ²张婧 ³杨苗 ³谢礼 ³安微 ³林华³

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作者信息

1. 成都农业科技职业学院宠物营养与健康研究中心,成都611130
2. 四川省畜牧科学研究院动物遗传育种四川省重点实验室,成都611130
3. 成都海关技术中心食品安全检测四川省重点实验室,成都610041
折叠

摘要

为了进一步分析谷氨酸消旋酶的结构和生物信息功能,试验以γ-P GA生产菌株地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)DY136为材料,PCR扩增其谷氨酸消旋酶基因(racE),纯化racE基因进行原核表达,并运用多种在线生物信息学分析软件对该基因编码蛋白质的理化性质、亲/疏水性、信号肽、结构域等进行分析.结果表明:PCR扩增racE基因条带大小为819 bp,对racE基因进行大肠杆菌原核表达,通过构建表达载体和优化表达条件,成功表达了大小为30.15 ku的重组融合蛋白.racE蛋白编码272个氨基酸,氨基酸序列与NCBI中公布的地衣芽孢孢杆菌racE蛋白(GenBank登录号为KAA0845975.1)氨基酸同源性为99.62％.racE蛋白理化性质稳定,是亲水蛋白,无跨膜结构域,不含有信号肽,α-螺旋是其主要的二级结构,主要定位于细胞质中(73.90％).说明racE基因保守且相对稳定,在谷氨酸的合成中发挥重要作用.

关键词

地衣芽孢杆菌/谷氨酸消旋酶/racE基因/克隆/原核表达/生物信息学分析

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基金项目

成都市技术创新研发项目(2019-YF05-00119-SN)

四川省中央引导地方科技发展专项(2020ZYD025)

四川省重点研发计划(2020YFS0469)

成都农业科技职业学院校级科研基金(20ZR101)

海关总署科研项目(2019HK045)

出版年

2022

黑龙江畜牧兽医(下半月)

ISSN：

参考文献量2

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