黑龙江畜牧兽医(下半月)2022，Issue(5) ：82-85.DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.04.0127

非洲猪瘟病毒MGF360-13L蛋白的原核表达研究

Study on prokaryotic expression of African swine fever virus MGF360-13L protein

魏天 王成宇 王凤杰 张守峰 扈荣良 张芳毓 吕礼良 王永志
黑龙江畜牧兽医(下半月)2022，Issue(5) ：82-85.DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.04.0127
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非洲猪瘟病毒MGF360-13L蛋白的原核表达研究

Study on prokaryotic expression of African swine fever virus MGF360-13L protein

魏天 1王成宇 1王凤杰 2张守峰 2扈荣良 2张芳毓 1吕礼良 1王永志1
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作者信息

  • 1. 吉林省农业科学院,长春130124
  • 2. 中国农业科学院长春兽医研究所,长春130122
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摘要

为了获得非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)体外诱导表达的MGF360-13L蛋白,试验依据GenBank中报道的MGF360-13L基因序列设计引物,引入His标签,以ASFV全序列为模板扩增目的片段.将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-6p-1上,转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞中进行体外诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-P AGE)分析蛋白质的表达情况,将表达的重组蛋白通过镍琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化,蛋白质印迹(Western-blot)分析蛋白质的活性.结果表明:克隆得到的MGF360-13L基因片段长度为1 060 bp,获得的重组蛋白在沉淀中以包涵体的形式表达,分子质量约为60 ku,纯化后可获得纯度较高的MGF360-13L,用BCA法测定最高浓度为2.73 mg/mL.Western-blot检测结果显示在60 ku处有一条明显的特异性条带说明MGF360-13L蛋白可以在BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞中表达并纯化,纯化后可获得纯度较高的MGF360-13L,且具有良好的反应原性.

关键词

非洲猪瘟病毒/MGF360-13L蛋白/原核表达/蛋白纯化/蛋白质印迹

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基金项目

军事医学专项横向委托项目(2019Y03013)

吉林省农业科技创新工程项目(CXGC2021TD008)

吉林省农业科技创新工程项目(CXGC2021ZY033)

出版年

2022
黑龙江畜牧兽医(下半月)

黑龙江畜牧兽医(下半月)

ISSN：
参考文献量1
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