非洲猪瘟病毒MGF360-13L蛋白的原核表达研究

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中文摘要：为了获得非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)体外诱导表达的MGF360-13L蛋白,试验依据GenBank中报道的MGF360-13L基因序列设计引物,引入His标签,以ASFV全序列为模板扩增目的片段.将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-6p-1上,转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞中进行体外诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-P AGE)分析蛋白质的表达情况,将表达的重组蛋白通过镍琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化,蛋白质印迹(Western-blot)分析蛋白质的活性.结果表明:克隆得到的MGF360-13L基因片段长度为1 060 bp,获得的重组蛋白在沉淀中以包涵体的形式表达,分子质量约为60 ku,纯化后可获得纯度较高的MGF360-13L,用BCA法测定最高浓度为2.73 mg/mL.Western-blot检测结果显示在60 ku处有一条明显的特异性条带说明MGF360-13L蛋白可以在BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞中表达并纯化,纯化后可获得纯度较高的MGF360-13L,且具有良好的反应原性.

外文标题：Study on prokaryotic expression of African swine fever virus MGF360-13L protein

作者：

魏天、王成宇、王凤杰、张守峰、扈荣良、张芳毓、吕礼良、王永志

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作者单位：

吉林省农业科学院,长春130124

中国农业科学院长春兽医研究所,长春130122

关键词：

非洲猪瘟病毒 MGF360-13L蛋白原核表达蛋白纯化蛋白质印迹

基金：

军事医学专项横向委托项目吉林省农业科技创新工程项目吉林省农业科技创新工程项目

项目编号：

2019Y03013CXGC2021TD008CXGC2021ZY033

出版年：

2022

DOI：

10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.04.0127

黑龙江畜牧兽医(下半月)

ISSN：

年,卷(期)：2022.(5)

参考文献量1