摘要
为建立用实时SYBR GreenI荧光定量PCR方法检测PSV VP1基因表达量的标准曲线,试验根据目的基因在NCBI上CDS区的序列设计合成引物,用T4连接酶将目的片段与pMD18-T载体连接,构建重组质粒,采用real-time RT-PCR的检测方法,建立了检测猪萨佩罗病毒VP1基因表达量的标准曲线.试验结果显示,线性回归系数为0.998 1,且熔解曲线只有一个峰值,表明由VP1目的基因所建立的标准曲线线性关系良好.试验成功建立了用SYBR GreenI荧光定量RT-PCR方法检测猪萨佩罗病毒VP1基因表达量的标准曲线,为后续检测基因表达量的变化奠定了基础.
基金项目
24IRTSTHN034河南省教育厅创新团队项目()
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