雨生红球藻八氢番茄红素脱氢酶pds基因上游序列的分离和分析
Cloning and functional characterization of phytoene desaturase gene (pds) promoter from Haematococcus pluvlialis
梁成伟 1檀琮萍 2苏忠亮 3魏魏 4秦松4
作者信息
- 1. 青岛科技大学生物系,山东,青岛,266042;中国科学院海洋研究所海洋生物重点实验室,山东,青岛,266071
- 2. 中国科学院海洋研究所海洋生物重点实验室,山东,青岛,266071;山东轻工业学院食品与生物工程学院,山东,济南,250353
- 3. 青岛科技大学生物系,山东,青岛,266042
- 4. 中国科学院海洋研究所海洋生物重点实验室,山东,青岛,266071
- 折叠
摘要
在某些蓝藻、绿藻和高等植物中,八氢番茄红素脱氢酶是β-胡萝卜素合成过程中的一个关键酶之一,应用巢式PCR方法从雨生红球藻中克隆了八氢番茄红素脱氢酶基因约1kb的5'上游序列.通过生物信息学方法进行序列分析,发现pds基因上游序列中包含了一些可能的顺式元件,如ABRE 调控元件、C-repeat/DRE调控元件等.同时,构建了由pds-启动子控制报告基因的重组载体,并转化到雨生红球藻细胞中,进行了报告基因瞬间表达的检测.结果表明,克隆的pds启动子区域具有启动子活性,可以驱使报告基因进行瞬间表达.
Abstract
Phytoene desaturase is one of the most important enzymes necessary for the biosynthesis of carotenoids in some cyanobacteria,green algae and plants.To locate transcriptional regulation elements,we isolated an approximate 1 kb of 5'flanking region by genome-walking method.Results of bioinformatic analysis showed that several putative cis-elements like the ABRE motif(abscisic acid responsive element),the C-repeat/DRE(dehydration responsive element) motif and the GCN4 motif were located in 5'flanking region of pds.Then,we constructed the recombinant plasmid containing the reporter gene lacZ driven by pds promoter and transferred the plasmid into the cells.The transient expression results showed that pds promoter activity can be detected.
关键词
雨生红球藻/八氢番茄红素脱氢酶基因/启动子/瞬间表达Key words
Haematococcus Pluvialis/phytoene desaturase gene/promoter/transient expression引用本文复制引用
基金项目
国家自然科学基金(30470156)
青岛科技大学博士科研启动基金(0022323)
出版年
2009
NETL
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