目的:确定无血清培养基富集结肠癌干细胞的更佳方案,为后续结肠癌干细胞分选及相关研究提供技术参考.方法:选用含胎牛血清常规培养基(A组)、添加生长因子(B27、EGF、bFGF、LIF)无血清培养基(B组)和添加(B27、EGF、bFGF)无血清培养基(C组)分别培养结肠癌干细胞球,通过细胞分化实验及裸鼠成瘤实验建立结肠癌动物模型.结果:有血清培养基不能使结肠癌colo205细胞形成结肠癌干细胞球,两组添加不同生长因子的无血清培养基均能使结肠癌colo205细胞形成结肠癌干细胞球,其中B组成球时间为7天左右,而C组为10天左右,所形成的的结肠癌干细胞球均能在有血清培养基中分化为普通结肠癌colo205细胞,且B组和C组的成瘤能力均强于A组(均P＜0.05).结论:两组无血清培养基均能培养出结肠癌干细胞球,且添加细胞因子(B27、EGF、bFGF、LIF)的无血清培养基为更佳方案,能缩短富集结肠癌干细胞的成球时间.
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