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小鼠PEDF基因的克隆鉴定及原核表达分析

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目的：：克隆小鼠PEDF基因,构建其原核表达载体并进行初步诱导表达.方法：根据 GenBank提供的 mRNA 序列设计引物,并分别加上 EcoR I/Hind III 酶切位点.提取小鼠肝脏总RNA,RT－PCR法扩增小鼠PEDF基因,然后连接到T载体并测序鉴定.将酶切得到的PEDF基因连接到原核表达载体 pET－28a,酶切验证.将构建好的重组载体转化到表达菌株 E．coli M15中,经过 IPTG诱导后对细胞破碎液进行 SDS－PAGE电泳检测.结果：测序表明成功克隆小鼠PEDF基因,酶切表明小鼠PEDF基因原核表达载体构建成功,SDS－PAGE电泳表明重组载体能够在 E．coli M15中进行诱导表达.结论：成功克隆小鼠PEDF基因,并构建其原核表达载体,重组载体能够在 E．coli M15中内进行诱导表达.

杨森、吴艳芳、贾岩龙

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新乡医学院药学院 新乡 453003

新乡医学院基础医学院 新乡 453003

血管生成抑制因子 小鼠 色素上皮衍生因子 原核表达

2015

10.3969/j.issn.1671-8801.2015.01.001

健康之路
广东省医学会 中国保健协会

健康之路

ISSN：1671-8801
年,卷(期)：2015.(1)
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