摘要
目的：：克隆小鼠PEDF基因,构建其原核表达载体并进行初步诱导表达.方法：根据 GenBank提供的 mRNA 序列设计引物,并分别加上 EcoR I/Hind III 酶切位点.提取小鼠肝脏总RNA,RT－PCR法扩增小鼠PEDF基因,然后连接到T载体并测序鉴定.将酶切得到的PEDF基因连接到原核表达载体 pET－28a,酶切验证.将构建好的重组载体转化到表达菌株 E．coli M15中,经过 IPTG诱导后对细胞破碎液进行 SDS－PAGE电泳检测.结果：测序表明成功克隆小鼠PEDF基因,酶切表明小鼠PEDF基因原核表达载体构建成功,SDS－PAGE电泳表明重组载体能够在 E．coli M15中进行诱导表达.结论：成功克隆小鼠PEDF基因,并构建其原核表达载体,重组载体能够在 E．coli M15中内进行诱导表达.
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