江苏农业科学2024，Vol.52Issue(12) ：183-187.DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2024.12.024

N端携带HBGAs受体结合表位的兔出血症病毒嵌合VP60蛋白的表达及其免疫原性

董文宇 刘维龙 胡波 范志宇 魏后军 仇汝龙 宋艳华 陈萌萌 葛雷 熊富强 王芳
江苏农业科学2024，Vol.52Issue(12) ：183-187.DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2024.12.024
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N端携带HBGAs受体结合表位的兔出血症病毒嵌合VP60蛋白的表达及其免疫原性

董文宇 1刘维龙 1胡波 2范志宇 3魏后军 2仇汝龙 2宋艳华 2陈萌萌 2葛雷 2熊富强 4王芳2
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作者信息

  • 1. 西藏农牧学院,西藏林芝 860000;江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程重点实验室,江苏南京 210014
  • 2. 江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程重点实验室,江苏南京 210014;兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心,江苏泰州 225300
  • 3. 西藏农牧学院,西藏林芝 860000;江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程重点实验室,江苏南京 210014;兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心,江苏泰州 225300
  • 4. 西藏农牧学院,西藏林芝 860000;南京农业大学,江苏南京 210095
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摘要

将HBGAs受体结合表位插入兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60的N端,分析嵌合VP60蛋白的表达及病毒样颗粒(VLPs)形成情况,并研究N端HBGAs受体结合表位的插入对嵌合VP60蛋白免疫原性的影响.通过VP60蛋白N端起始位点HBGAs受体结合表位的插入,获得表位插入的VP60基因.利用Bac-to-Bac系统构建杆状病毒重组质粒,命名为Bacmid-VP60-CR,转染Sf9昆虫细胞后,得到重组杆状病毒rBac-VP60-CR,经HA、IFA和Western Blot鉴定,结果显示,重组蛋白VP60-CR在Sf 9昆虫细胞中得到高效表达,电镜观察显示其可形成与VP60类似的VLPs结构.将重组蛋白免疫2月龄RHDV血清阴性的新西兰兔,200 µg/只,免疫后每周采血检测HBGAs表位抗体水平,同时在免疫后14 d,以RHDV WF株攻毒观察VP60-CR重组蛋白的免疫保护效果.结果显示,与VP60对照相比,VP60-CR蛋白可产生更高水平的针对HBGAs表位的抗体水平,且VP60-CR免疫兔可完全抵抗RHDV强毒的攻击.本研究构建了一种N端插入HBGAs受体结合表位的嵌合VP60蛋白,为研究高免疫原性兔出血症基因工程疫苗抗原奠定了基础.

关键词

兔出血症病毒/VP60蛋白/HBGAs/病毒样颗粒/免疫原性

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基金项目

江苏省农业科技自主创新资金(CX231028)

现代农业产业技术体系建设专项(CARS-43-C-1)

出版年

2024
江苏农业科学
江苏省农业科学院

江苏农业科学

CSTPCD北大核心
影响因子：0.732
ISSN：1002-1302
参考文献量12
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