摘要
分离筛选出对葡萄致腐菌灰葡萄孢有较强拮抗作用的拮抗菌,丰富葡萄采后保鲜拮抗菌资源,以期为葡萄灰霉病的生物防治提供理论依据和奠定应用基础.利用组织块分离法在腐烂的葡萄果实中分离得到灰葡萄孢,梯度稀释法从葡萄园土壤中分离得到潜力拮抗菌,通过平板对峙及琼脂扩散法筛选出拮抗作用较强的生防菌,并通过形态学观察、生理生化测定、生物学鉴定确定其种属.通过对拮抗菌进行溶血性测定初步探索其是否对人体有溶血作用.分离得到的葡萄致腐菌通过形态学观察,病原菌PH-23菌丝初期呈灰白色,继续培养会逐渐转变为淡淡的青灰褐色,菌丝繁盛,孢子众多.对病原菌PH-23进行ITS、-tub序列分析,结合形态学特征确定其为灰葡萄孢.致病力测定结果表明,PH-23接种后葡萄症状与葡萄灰霉病症状相符,腐烂严重.筛选得到对葡萄致腐菌PH-23拮抗作用较强的生防菌TP-1,抑菌圈直径为22.49 mm.通过形态学观察,菌体为杆状,芽孢呈椭圆形,大小为0.62 μm × 2.35 μm.TP-1革兰氏染色阳性.生理生化鉴定结果初步认为TP-1为芽孢杆菌.基于16S rDNA基因、rpoB基因、gyrB基因序列分析确定其为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis).拮抗菌TP-1的溶血性测定显示其对人体无溶血作用.拮抗菌TP-1对灰葡萄孢有较强的拮抗作用,在葡萄采后贮藏及生物保鲜中具有潜在的应用价值.