使用健康家畜血浆做布鲁氏菌病虎红平板凝集试验(RBT)时,容易出现假阳性现象.本文旨在探讨含抗凝剂的血液样品对家畜(牛、羊、猪)RBT试验的影响.本研究选取健康牛、羊、猪的血样各10份和4份布病抗体阳性牛血样.将试验分成4组,第1组的血样自然凝固离心获得血清(对照组),分离的血清和血浆进行RBT试验,其余3组分别添加EDTA-K2、枸椽酸钠、肝素钠3种抗凝剂,同时4组血液样品采用竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)对比RBT的特异性和一致性.将34份家畜血清各分装成3份,直接加入到3种不同抗凝剂管中,做RBT,观察抗凝剂对检测结果是否存在直接影响;所有血浆加入凝血酶时间(PT)试剂处理后,取其上清液做虎红平板凝集试验,观察结果,分析干扰因素和处理方案.结果显示,30头健康家畜的血浆均是阳性,而血清均是阴性,4头布病抗体阳性牛的血浆和血清结果均是阳性,说明抗凝剂导致RBT出现非特异性凝集,且无畜种差异.使用PT试剂能消除部分抗凝剂(EDTA-K2、枸椽酸钠)制备血浆的非特异性凝集,由于虎红抗原与血浆中纤维蛋白原能产生非特异性凝集,导致出现假阳性.因此,给家畜做布病初筛时,不能直接用血浆做RBT,可通过PT试剂处理血浆中纤维蛋白原后消除干扰因素(肝素钠血浆除外),也可以直接用血浆做cELISA试验,为临床布病诊断提供检测参考数据.
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