摘要
[目的]本研究旨在通过饲喂法对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂幼虫肠道中ame-miR-bantam 进行过表达与敲减,明确ame-miR-bantam对靶基因USP和P300表达的调控作用.[方法]通过饲喂 ame-miR-bantam 模拟物(mimic-ame-miR-bantam)和抑制物(inhibitor-ame-miR-bantam)及相应的阴性对照 mimic-NC-ame-miR-bantam 和 inhibitor-NC-ame-miR-bantam,对意大利蜜蜂工蜂4-6日龄幼虫肠道组织中的ame-miR-bantam分别进行过表达和敲减.利用生物信息学软件进行ame-miR-bantam的靶向预测及分析.通过RT-qPCR检测4-6日龄意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道中ame-miR-bantam的过表达和敲减效果及靶基因USP和P300的相对表达量.[结果]相较于饲喂 mimic-NC-ame-miR-bantam,饲喂 mimic-ame-miR-bantam 后,ame-miR-bantam 在意大利蜜蜂4-6日龄工蜂幼虫肠道中均显著上调;相较于饲喂inhibitor-NC-ame-miR-bantam,饲喂inhibitor-ame-miR-bantam后,ame-miR-bantam在4日龄工蜂幼虫肠道中显著下调,在5日龄和6日龄工蜂幼虫肠道中下调表达.ame-miR-bantam共靶向222个基因,可注释到细胞进程等35个GO条目和Wnit信号通路等160条KEGG通路.相比于饲喂mimic-NC-ame-miR-bantam的阴性对照组,过表达ame-miR-bantam后,4日龄工蜂幼虫肠道中USP和P300的表达量均为上调;5日龄工蜂幼虫肠道中USP的表达量下调,P300显著下调表达;6日龄工蜂幼虫肠道中USP和P300均显著下调表达.相比于饲喂inhibitor-NC-ame-miR-bantam的阴性对照组,敲减ame-miR-bantam后,4和5日龄工蜂幼虫肠道中USP和P300的表达量均为上调;6日龄工蜂幼虫肠道中USP显著上调表达,P300的表达量上调.[结论]通过饲喂模拟物和抑制物能够分别实现意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道中ame-miR-bantam 的有效过表达和敲减;幼虫肠道中ame-miR-bantam可负调控USP和P300的表达.
基金项目
国家自然科学基金(32172792)
国家自然科学基金(31702190)
现代农业产业技术体系建设专项(CARS-44-KXJ7)
福建省自然科学基金(2022J01131334)
福建农林大学硕士生导师团队项目(郭睿)()
福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)科研扶持项目()
维普
万方数据