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ame-miR-14在意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道发育过程的调控作用

Regulatory role of ame-miR-14 in the developmental process of the larval guts of Apis mellifera ligustica(Hymenoptera:Apidae)workers

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[目的]本研究旨在揭示ame-miR-14在意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂幼虫肠道发育过程的调控作用.[方法]通过Stem-loop RT-PCR和Sanger测序分别验证ame-miR-14在意大利蜜蜂工蜂6日龄幼虫肠道中的表达和序列真实性.饲喂ame-miR-14的模拟物(mimic-ame-miR-14)和抑制物(inhibitor-ame-miR-14)及其相应的阴性对照mimic-NC和inhibitor-NC对ame-miR-14分别进行过表达和敲降,利用RT-qPCR检测意大利蜜蜂工蜂4-6日龄幼虫肠道中ame-miR-14的表达量.利用生物信息学软件预测ame-miR-14的靶基因并进行相关分析.利用RT-qPCR检测ame-miR-14 的过表达和敲降后其靶基因FoxO和Hedgehog在4-6日龄幼虫肠道中的相对表达量.[结果]ame-miR-14在意大利蜜蜂工蜂6日龄幼虫肠道中真实存在和表达.相较于饲喂mimic-NC,饲喂mimic-ame-miR-14后ame-miR-14表达量在意大利蜜蜂工蜂4-6日龄幼虫肠道中均为显著上调;相较于饲喂inhibitor-NC,饲喂inhibitor-ame-miR-14后ame-miR-14表达量在意大利蜜蜂工蜂4-6日龄幼虫肠道中皆为显著下调.ame-miR-14共靶向309个基因,可注释到45条KEGG通路和36个GO条目;进一步分析发现ame-miR-14可靶向14个生长发育相关基因,并与FoxO和Hedgehog之间存在潜在的靶向关系.过表达ame-miR-14后,相较于mimic-NC组,mimic-ame-miR-14组的4日龄幼虫肠道内FoxO表达量下调,5和6日龄幼虫肠道内FoxO表达量均为显著下调;敲降 ame-miR-14 后,相较于 inhibitor-NC 组,inhibitor-ame-miR-14 组 4 日龄幼虫肠道内 FoxO 表达量下调,5日龄幼虫肠道内FoxO表达量显著上调,6日龄幼虫肠道内FoxO表达量上调.与mimic-NC 组相比,过表达ame-miR-14后mimic-ame-miR-14组的Hedgehog表达量在4-6日龄幼虫肠道内皆显著下调;与 inhibitor-NC 组相比,敲降 ame-miR-14 后 inhibitor-ame-miR-14 组的 Hedgehog 表达量在4-6日 龄幼虫肠道内均为上调.[结论]ame-miR-14在意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道内真实存在和表达;通过饲喂模拟物和抑制物能够分别实现意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道内ame-miR-14的有效过表达和敲降;ame-miR-14通过负调控FoxO和Hedgehog的表达潜在参与调节幼虫肠道发育.

王紫馨、许雅静、张文德、张凯遥、吴鹰、刘佳美、朱乐冉、牛庆生、赵红霞、陈大福、郭睿

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福建农林大学动物科学学院(蜂学学院),福州350002

吉林省养蜂科学研究所,吉林132000

广东省科学院动物研究所,广州510260

福建省蜂疗研究所,福州350002

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意大利蜜蜂 幼虫 肠道 ame-miR-14 靶基因 调控 发育

国家自然科学基金国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系专项福建省自然科学基金面上项目福建农林大学硕士生导师团队项目(郭睿)福建农林大学科技创新专项基金(郭睿)福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)科研扶持项目(郭睿)

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2023

昆虫学报
中国科学院动物研究所,中国昆虫学会

昆虫学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:0.756
ISSN:0454-6296
年,卷(期):2023.66(1)
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