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东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂工蜂过程中nce-miR-10660及其靶基因表达谱

Expression profiles of nce-miR-10660 and its target genes in Apis mellifera ligustica workers during the infection of Nosema ceranae

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[目的]本研究旨在为探究nce-miR-10660调控东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae侵染的作用机制提供理论和实验依据.[方法]采用Stem-loop RT-PCR对前期鉴定到的东方蜜蜂微孢子虫nce-miR-10660进行表达验证,再通过Sanger测序验证nce-miR-10660的序列.利用相关生物信息学软件预测和分析nce-miR-10660的靶基因.通过RT-qPCR检测nce-miR-10660及其靶基因在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂Apismellifera ligustica工蜂过程中中肠中的表达谱.[结果]Stem-loop RT-PCR和Sanger测序结果分别证实了 nce-miR-10660在东方蜜蜂微孢子虫孢子中的表达和真实存在.靶向预测结果显示nce-miR-10660共靶向RRDRP和RCDP 42等9个基因;分别有2和6个靶基因可被分别注释到KEGG数据库中的4条通路和GO数据库中的23个条目.RT-qPCR结果显示,相较于东方蜜蜂微孢子虫侵染后1 d时意大利蜜蜂工蜂中肠中nce-miR-10660的表达量,东方蜜蜂微孢子虫侵染后2 d时意大利蜜蜂工蜂中肠中nce-miR-10660的表达量显著上调,在东方蜜蜂微孢子虫侵染后4,6和8 d时意大利蜜蜂工蜂中肠中nce-miR-10660的表达量均显著下调;东方蜜蜂微孢子虫侵染后4,6和8 d时意大利蜜蜂工蜂中肠中靶基因RRDRP的表达量均显著下调表达;东方蜜蜂微孢子虫侵染后2,4,6和8 d时意大利蜜蜂工蜂中肠中靶基因RCDP42的表达量显著下调.[结论]nce-miR-10660在东方蜜蜂微孢子虫孢子中真实存在和表达;nce-miR-10660及其靶向的RRDRP和RCDP 42在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂工蜂过程中差异表达;nce-miR-10660 通过正调控RRDRP和RCDP 42表达潜在参与调节东方蜜蜂微孢子虫侵染.

张凯遥、张文德、王紫馨、胡颖、钱加珺、王思懿、赵浩东、顾小雨、牛庆生、付中民、陈大福、郭睿

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福建农林大学动物科学学院(蜂学学院),福州350002

吉林省养蜂科学研究所,吉林132000

福建省蜂疗研究所,福州350002

东方蜜蜂微孢子虫 意大利蜜蜂 nce-miR-10660 靶基因 表达谱

国家自然科学基金面上项目国家现代农业产业技术体系建设专项福建省自然科学基金面上项目福建农林大学硕士生导师团队项目(郭睿)福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)科研扶持项目(郭睿)省级大学生创新创业训练计划

32172792CARS-44-KXJ72022J01131334S202110389073

2023

昆虫学报
中国科学院动物研究所,中国昆虫学会

昆虫学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:0.756
ISSN:0454-6296
年,卷(期):2023.66(2)
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