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结核分枝杆菌Ag85B基因克隆及真核表达质粒pIRES-Ag85B的构建
结核分枝杆菌Ag85B基因克隆及真核表达质粒pIRES-Ag85B的构建
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中文摘要:
目的:克隆并构建编码结核分枝杆菌Ag85B分泌蛋白的重组真核表达质粒,为进一步研究其在开发新型的结核病疫苗和结核病免疫诊断试剂奠定了基础。方法:采聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Ag85B基因,然后用双内切酶消化PCR产物和pIRES质粒,用T4 DNA连接酶连接后,转化入感受态E.coli DH5a,产物铺AmpR抗性的平板,阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定并进入blast网页比对测序的序列。结果:酶切鉴定所切下的片段大小与预计相符,测序比对后结果与目的基因完全一致,证实符
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关键词:
结核分枝杆菌(MTB)
Ag85B基因
pIRES质粒
基因重组
基金:
项目编号:
81041083
KJ2009A164
出版年:
2011
科技信息(学术版)
山东省技术开发服务中心
科技信息(学术版)
ISSN:
1001-9960
年,卷(期):
2011.
(10)