理化检验-化学分册2023,Vol.59Issue(1) :29-33.DOI:10.11973/lhjy-hx202301004

酶促反应结合灰度分析技术快速测定烟草及其制品中葡萄糖的含量

Rapid Determination of Glucose in Tobacco and Its Products by Enzymatic Reaction with Gray-Scale Analysis

彭丽娟 何声宝 刘宇晨 袁源 卢钒 李苓 王春琼 张威
理化检验-化学分册2023,Vol.59Issue(1) :29-33.DOI:10.11973/lhjy-hx202301004

酶促反应结合灰度分析技术快速测定烟草及其制品中葡萄糖的含量

Rapid Determination of Glucose in Tobacco and Its Products by Enzymatic Reaction with Gray-Scale Analysis

彭丽娟 1何声宝 2刘宇晨 1袁源 3卢钒 4李苓 1王春琼 1张威2
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作者信息

  • 1. 云南省烟草质量监督检测站,昆明 650106
  • 2. 国家烟草质量监督检验中心,郑州 450001
  • 3. 中国农业科学院烟草研究所,青岛 266000
  • 4. 武汉大学,武汉 430072
  • 折叠

摘要

烟草样品溶液中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶和过氧化物酶的作用下,可使色原性氧受体4-氨基安替比林与酚定量缩合,生成红色醌类化合物,通过Image软件将溶液颜色转化为灰度值信号,从而确定样品中葡萄糖的含量.样品经干燥、研磨后,分取(0.1±0.0001)g,加入20 mL水,于(30±0.5)℃振荡萃取30 min.用快速定性滤纸过滤,弃去初始滤液,收集后续的2~3 mL滤液备用.移取100μL上述滤液于装有R1和R2试剂各450μL的2 mL微量离心管中,混匀后置于(37±0.5)℃的恒温水浴摇床中反应5 min.利用智能手机对显色液拍照,通过Image软件将彩色图片转化为灰度模式,得到灰度值.以水为参比,对显色液灰度值进行归一化处理,得到灰度值比值.以葡萄糖浓度的对数为横坐标,灰度值比值为纵坐标绘制标准曲线.结果显示:标准曲线的线性范围为0.100~4.000 mmol•L-1,检出限(3s)为0.0216 mmol•L-1;对相同浓度的葡萄糖、果糖、甘露糖、木糖等9种糖类化合物标准溶液进行测定,除葡萄糖外,其余糖类显色液的灰度值与空白溶液无明显差别;对标准烤烟样品进行精密度和回收试验,测定值的相对标准偏差(n=6)均不大于4.0%,葡萄糖的加标回收率为98.3%~103%;方法用于实际样品分析,并与高效液相色谱法进行比对,结果表明在95%置信度下,两种方法测定结果无显著性差异.

关键词

烟草/葡萄糖/灰度值/酶促反应

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基金项目

云南省烟草专卖局重点项目(2020530000241036)

出版年

2023
理化检验-化学分册
上海材料研究所

理化检验-化学分册

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:0.647
ISSN:1001-4020
被引量1
参考文献量13
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