摘要
目的 建立米黄色脂肪细胞分化的方法并进行分析.方法 通过诱导物刺激使脂肪前体细胞3T3-L1向米黄色脂肪细胞分化.细胞分化完成后经油红染色检测胞内脂滴的形成,经荧光定量PCR和Western blot检测米黄色脂肪细胞标志性蛋白Pparγ,Prdm16和Ucp1的表达,确定分化成熟的细胞是米黄色脂肪细胞.经转录测序分析脂肪前体细胞和米黄色脂肪细胞差异表达基因及KEGG pathway富集情况.结果 采用本研究中的诱导分化方法得到的分化细胞油红染色阳性,米黄色脂肪细胞标志性蛋白Pparγ、Prdm16、Ucp1均高表达,转录测序显示分化后细胞与未分化细胞基因表达差异较大.结论 本研究建立的米黄色脂肪细胞分化的方法准确可靠,可用于米黄色脂肪细胞形成调控机制等研究.
基金项目
国家自然科学基金青年基金(81700774)
徐州医科大学优秀人才科研启动基金(53591518)
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