蜜蜂黑色王台病毒SYBR Green Ⅰ RT-qPCR检测方法的建立

A Real-time Quantitative RT-PCR Assay for the Detection of Black Queen-Cell Virus in Honeybee

李月龙 ¹周丹银 ¹赵文正 ¹冯毅楠 ¹和绍禹 ¹尹革芬²

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作者信息

1. 云南农业大学东方蜜蜂研究所,云南昆明650201
2. 云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201
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摘要

为建立蜜蜂黑色王台病毒RT-qPCR检测方法,以蜜蜂黑色王台病毒(BQCV)衣壳蛋白基因部分序列作为目的基因,构建标准质粒并作为模板,建立标准曲线,且对所建立方法的灵敏度和特异性进行分析.结果表明:所建立的RT-qPCR检测方法,扩增效率E=108％,可信度R2=0.997.该方法灵敏度高,最低检出量为101个拷贝;该方法特异性强,仅能检出BQCV,而不能检测出蜜蜂囊状幼虫病毒、畸翅病毒.以上结果表明已成功建立了针对BQCV灵敏、特异的RT-qPCR检测方法.

关键词

蜜蜂黑色王台病毒/RT-qPCR/灵敏度/特异性/检测

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基金项目

国家蜂产业技术体系建设专项(CARS-45-kxj14)

出版年

2016

蜜蜂杂志

云南省农业科学院

蜜蜂杂志

影响因子：0.047

ISSN：1003-9139

参考文献量2

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