CEL Ⅰ酶是Eco-TILLING技术的关键酶.实验采用酶切连接的方法构建了酶切位点上插入突变的质粒,应用该质粒能方便有效地检测CEL Ⅰ活性.进一步简化CEL Ⅰ酶的提取方法,并对每一步提取液样品进行活性检测.结果表明,芹菜汁也具有明显的酶切活性,进一步的提纯能提高其活性,琼脂糖凝胶电泳也能获得直观的检测结果,通过简化程序可高效应用于植物Eco-TILLING分析.该研究结果有利于Eco-TILLING技术的广泛使用,对于建立简易而又有效的点突变检测方法具有重要的意义.
High effiective Activity Assay of CELⅠ and Its Application in Eco-TILLING
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